Ахбор

Ташаккур ба шумо барои боздид аз Nature.com.Версияи браузере, ки шумо истифода мебаред, дастгирии маҳдуди CSS дорад.Барои таҷрибаи беҳтарин, мо тавсия медиҳем, ки шумо браузери навшударо истифода баред (ё Ҳолати мутобиқатро дар Internet Explorer хомӯш кунед).Дар ҳамин ҳол, барои таъмини дастгирии доимӣ, мо сайтро бе услубҳо ва JavaScript пешкаш хоҳем кард.
Фотосенсибилизаторҳои самаранок барои истифодаи васеъи клиникии фототерапия махсусан муҳиманд.Бо вуҷуди ин, фотосенсибилизаторҳои анъанавӣ одатан аз ҷаббидашавии кӯтоҳи мавҷ, устувории нокифоя, ҳосили пасти квантии намудҳои оксигени реактивӣ (ROS) ва хомӯшшавии ҷамъшавии ROS азият мекашанд.Дар ин ҷо мо дар бораи фотосенсибилизатори наздик-инфрасурх (NIR) супрамолекулярӣ (RuDA) гузориш медиҳем, ки тавассути худмонтажкунии комплексҳои металлҳои органометаллӣ Ru(II)-арен дар маҳлули обӣ миёнаравӣ шудааст.RuDA метавонад танҳо дар ҳолати ҷамъшуда оксигени синглӣ (1O2) тавлид кунад ва он аз сабаби афзоиши назарраси раванди кроссовер байни системаи синглет-триплет рафтори ошкори тавлиди 1O2-ро нишон медиҳад.Дар зери таъсири нури лазерии 808 нм, RuDA ҳосили квантии 1O2 16,4% (индосианини сабзи аз ҷониби FDA тасдиқшуда: ΦΔ = 0,2%) ва самаранокии баланди табдили фототермалии 24,2% (nanorods тиллоӣ) бо устувории аъло нишон медиҳад.: 21,0%, нанопулакҳои тиллоӣ: 13,0%).Илова бар ин, RuDA-NP-ҳои бо биомутобиқатии хуб метавонанд афзалиятнок дар ҷойҳои варам ҷамъ шаванд, ки боиси регрессияи назарраси варам ҳангоми терапияи фотодинамикӣ бо 95,2% кам шудани ҳаҷми варам дар vivo мегардад.Ин терапияи фотодинамикӣ-афзояндаи агрегатсия стратегияи таҳияи фотосенсибилизаторҳоро бо хосиятҳои мусоиди фотофизикӣ ва фотохимиявӣ таъмин менамояд.
Дар муқоиса бо терапияи анъанавӣ, терапияи фотодинамикӣ (PDT) як табобати ҷолиб барои саратон бо сабаби бартариҳои назарраси он, аз қабили назорати дақиқи фазо-вақтӣ, ғайриинвазивӣ, муқовимати ночиз ба маводи мухаддир ва кам кардани таъсири тараф 1,2,3.Дар зери шуоъдиҳии рӯшноӣ, фотосенсибилизаторҳои истифодашаванда метавонанд фаъол карда шаванд, то намудҳои хеле реактивии оксигенро (ROS) ба вуҷуд оранд, ки ба апоптоз/некроз ё аксуламали иммунӣ оварда мерасонанд4,5. Бо вуҷуди ин, аксари фотосенсибилизаторҳои анъанавӣ, аз қабили хлоринҳо, порфиринҳо ва антрахинонҳо, ҷабби нисбатан кӯтоҳи мавҷ доранд (басомади <680 нм), бинобар ин, аз сабаби азхудкунии шадиди молекулаҳои биологӣ (масалан, гемоглобин ва меланин) ба рӯшноӣ суст ворид мешаванд. минтақаи намоён 6,7. Бо вуҷуди ин, аксари фотосенсибилизаторҳои анъанавӣ, аз қабили хлоринҳо, порфиринҳо ва антрахинонҳо, ҷабби нисбатан кӯтоҳи мавҷ доранд (басомади <680 нм), бинобар ин, аз сабаби азхудкунии шадиди молекулаҳои биологӣ (масалан, гемоглобин ва меланин) ба рӯшноӣ суст ворид мешаванд. минтақаи намоён 6,7. Однако большинство обычных фотосенсибилизаторов, таких хлорины, порфирины ва антрахиони, обладают относительно коротковолновым поглощением (частота < 680 нм), ки барои гирифтани к плохому проникновые обеспечения обеспечивается к плохому проникование света возможности в области. Бо вуҷуди ин, аксари фотосенсибилизаторҳо ба монанди хлоринҳо, порфиринҳо ва антрахинонҳо ҷабби нисбатан кӯтоҳи дарозии мавҷ доранд (<680 нм), ки дар натиҷаи азхудкунии шадиди молекулаҳои биологӣ (масалан, гемоглобин ва меланин) ба минтақаи намоён воридшавии нури суст мегардад6,7.然而, 大多数 传统 的 光敏剂, 如 二 氢 卟酚, 卟啉 和 氢 卟酚, 卟啉 和 蒽醌 蒽醌蒽醌, 具有 相对 较 短 的 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 对 对 生物 生物 分子 分子 (如 血红 和 黑色素 黑色素) 的 强烈 吸收,导致光穿透性差。然而, 大多数 传统 的 光敏剂, 二 氢 卟酚 卟酚, 二 蒽醌 卟酚, 具有 蒽醌蒽醌, 具有 蒽醌 短 短 短 的 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 語 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 語 波长 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 分子 分子 分子 分子 分子 分子 (血红 蛋白 对 分子) 的,, 吸收 吸收吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 HI导致光穿透性差。 Однако большинство традиционных фотосенсибилизаторов, таких как хлорины, порфирины ва антрахиони, имеют относительно коротковолновое поглощение (частота < 680 нм) аз-за сильного поглощения биомолекулӣ, инчунин ба даст овардани миқдори зиёди биологӣ. Бо вуҷуди ин, аксари фотосенсибилизаторҳои анъанавӣ ба монанди хлоринҳо, порфиринҳо ва антрахинонҳо аз сабаби ҷабби қавии биомолекулаҳо ба монанди гемоглобин ва меланин, азхудкунии нисбатан кӯтоҳи дарозии мавҷ доранд (басомади <680 нм), ки боиси воридшавии сусти нур мегардад.Майдони намоён 6.7.Аз ин рӯ, фотосенсибилизаторҳои ғарқкунандаи наздик-инфрасурх (NIR), ки дар “равзанаи терапевтӣ” дар масофаи 700–900 нм фаъол мешаванд, барои фототерапия хеле мувофиқанд.Азбаски нури инфрасурх дар наздикии бофтаҳои биологӣ камтар аз ҳама ҷаббида мешавад, он метавонад ба воридшавии амиқтар ва фотозарари камтар оварда расонад8,9.
Мутаасифона, фотосенсибилизаторҳои мавҷудаи NIR-абскунанда одатан устувории суст, қобилияти тавлиди оксигени синглӣ (1O2) ва хомӯшшавии агрегатсияи 1O2 доранд, ки татбиқи клиникии онҳоро маҳдуд мекунад10,11.Гарчанде ки барои беҳтар кардани хосиятҳои фотофизикӣ ва фотохимиявии фотосенсибилизаторҳои муқаррарӣ кӯшишҳои зиёд ба харҷ дода шудаанд, то ҳол дар якчанд гузоришҳо гузориш дода шудааст, ки фотосенсибилизаторҳои NIR-ро фаро гирифта метавонанд, ки ҳамаи ин мушкилотро ҳал кунанд.Илова бар ин, якчанд фотосенсибилизаторҳо барои тавлиди самараноки 1O212,13,14 ваъда доданд, ки ҳангоми шуоъ кардан бо нури зиёда аз 800 нм, зеро энергияи фотон дар минтақаи наздики IR зуд коҳиш меёбад.Трифениламин (TFA) ҳамчун донори электронӣ ва [1,2,5]тиадиазол-[3,4-i]дипиридо[а,с]феназин (TDP) ҳамчун гурӯҳи қабулкунандаи электронҳои навъи Донор-аксептор (DA) як синфро ранг мекунад. рангҳои , азхудкунии наздик-инфрасурх, ки ба таври васеъ барои биоimaging наздик-инфрасурх II ва терапияи фототермалии (PTT) аз сабаби банд танг худ омӯхта шудааст.Ҳамин тариқ, рангҳои навъи DA метавонанд барои PDT бо ҳаяҷони наздики IR истифода шаванд, гарчанде ки онҳо ҳамчун фотосенсибилизатор барои PDT хеле кам омӯхта шудаанд.
Маълум аст, ки самаранокии баланди убури байнисистемаи (ISC) фотосенсибилизаторҳо ба ташаккули 1O2 мусоидат мекунад.Стратегияи умумӣ барои пешбурди раванди ISC ин такмил додани пайвастагии чарх-орбитаи (SOC) фотосенсибилизаторҳо тавассути ворид кардани атомҳои вазнин ё қисмҳои махсуси органикӣ мебошад.Бо вуҷуди ин, ин равиш ҳанӯз ҳам баъзе нуқсонҳо ва маҳдудиятҳо дорад19,20.Ба наздикӣ, худсохти супрамолекулярӣ як равиши оқилонаи аз поён то боло барои истеҳсоли маводи функсионалӣ дар сатҳи молекулавӣ фароҳам овард, 21,22 бо бартариҳои сершумор дар фототерапия: (1) фотосенсибилизаторҳои худсохт метавонанд потенсиали ташаккули сохторҳои лента дошта бошанд.Монанди сохторҳои электронӣ бо тақсимоти зичтари сатҳҳои энергия аз сабаби такрори орбитаҳо байни блокҳои сохтмонӣ.Аз ин рӯ, мутобиқати энергетикӣ байни ҳолати ҳаяҷонбахши синглети поёнӣ (S1) ва ҳолати ҳамсояи сегонаи ҳаяҷонбахш (Tn) такмил дода мешавад, ки барои раванди ISC 23, 24 муфид аст.(2) Маҷмаи супрамолекулӣ истироҳати ғайрирадиатсионӣ дар асоси механизми маҳдудкунии ҳаракати дохилимолекулярӣ (RIM) -ро коҳиш медиҳад, ки он инчунин ба раванди ISC мусоидат мекунад 25, 26 .(3) Маҷмаи супрамолекулярӣ метавонад молекулаҳои дохилии мономерро аз оксидшавӣ ва таназзул муҳофизат кунад ва ба ин васила устувории фотосенсибилизаторро ба таври назаррас беҳтар кунад.Бо назардошти бартариҳои дар боло зикршуда, мо боварӣ дорем, ки системаҳои фотосенсибилизатори супрамолекулӣ метавонанд алтернативаи умедбахш барои бартараф кардани камбудиҳои PDT бошанд.
Комплексҳои дар асоси Ru(II) асосёфта платформаи ояндадори тиббӣ барои татбиқи эҳтимолӣ дар ташхис ва табобати бемориҳо аз сабаби хосиятҳои беназир ва ҷолиби биологии худ мебошанд28,29,30,31,32,33,34.Илова бар ин, фаровонии њолатњои ба њаяљон ва хосиятњои фотофизики-химиявии танзимшавандаи комплексњои Ру(II) барои коркарди фотосенсибилизаторњо дар асоси Ру(II) афзалиятњои калон медињанд35,36,37,38,39,40.Мисоли намоён ин комплекси рутений (II) полипиридил TLD-1433 мебошад, ки айни замон дар озмоишҳои клиникии Марҳилаи II ҳамчун фотосенсибилизатор барои табобати саратони узвҳои ғайримушакӣ (NMIBC)41 мебошад.Илова бар ин, комплексҳои рутений (II)-аренҳои органикӣ ҳамчун агентҳои химиотерапевтӣ барои табобати саратон бо сабаби заҳролудшавии паст ва осонии тағирёбанда ба таври васеъ истифода мешаванд42,43,44,45.Хусусиятҳои ионии комплексҳои металлоргакии Ру(II)-арен на танҳо қобилияти сусти хромофорҳои DA-ро дар ҳалкунандаҳои маъмул беҳтар карда метавонанд, балки ҷамъшавии хромофорҳои DA-ро низ беҳтар созанд.Илова бар ин, сохтори нимсандвичии псевдооктаэдралии комплексҳои органометаллӣ аз Ru(II)-аренҳо метавонад стеретикӣ аз H-агрегатсияи хромофорҳои навъи DA пешгирӣ кунад ва ба ин васила ба ташаккули J-агрегатсия бо бандҳои сурхчатобшуда мусоидат кунад.Аммо, нуқсонҳои хоси комплексҳои Ru(II)-arene, ба монанди устувории паст ва/ё дастрасии пасти биологӣ, метавонанд ба самаранокии табобатӣ ва фаъолияти in vivo комплексҳои арен-Ru(II) таъсир расонанд.Бо вуҷуди ин, тадқиқотҳо нишон доданд, ки ин камбудиҳоро тавассути капсулизатсияи комплексҳои рутений бо полимерҳои мувофиқ бо роҳи инкапсуляцияи ҷисмонӣ ё конъюгасияи ковалентӣ бартараф кардан мумкин аст.
Дар ин кор, мо маҷмӯаҳои DA-пайвандшудаи Ru(II)-arene (RuDA) бо триггери NIR тавассути пайванди координатсионии байни хромофори DAD ва қисми Ru(II)-арен гузориш медиҳем.Комплексҳои ҳосилшуда метавонанд бо сабаби таъсири мутақобилаи ғайриковалентӣ худ ба весикулаҳои металлосупрамолекулӣ дар об ҷамъ шаванд.Қобили зикр аст, ки маҷмӯаи супрамолекулярӣ RuDA-ро бо хосиятҳои кроссинг-верии байнисистемаи полимеризатсия ба вуҷуд овард, ки самаранокии ISC-ро ба таври назаррас афзоиш дод, ки барои PDT хеле мусоид буд (расми 1А).Барои зиёд кардани ҷамъшавии варамҳо ва мутобиқати биологӣ дар vivo, аз ҷониби FDA тасдиқшудаи Pluronic F127 (PEO-PPO-PEO) барои инкапсулизатсияи RuDA47,48,49 барои эҷоди нанозарраҳои RuDA-NP (Тасвири 1B), ки ҳамчун як PDT/ Dual-и хеле самаранок амал мекарданд, истифода шуд. ҳолати прокси PTT.Дар фототерапияи саратон (Расми 1С), RuDA-NP барои табобати мушҳои бараҳна бо варамҳои MDA-MB-231 барои омӯзиши самаранокии PDT ва PTT дар vivo истифода шудааст.
Тасвири схематикии механизми фотофизикии РуДА дар шаклхои мономерй ва агрегатсия барои фототерапияи саратон, синтези B RuDA-NPs ва C RuDA-NPs барои PDT ва PTT бо NIR фаъолшуда.
RuDA, ки аз функсияҳои TPA ва TDP иборат аст, мувофиқи тартиби дар расми иловагии 1 нишон додашуда омода карда шуд (Расми 2А) ва RuDA бо спектрҳои 1H ва 13C NMR, спектрометрияи массаи ионизатсияи электроспрей ва таҳлили элементарӣ тавсиф карда шуд (Расмҳои иловагӣ 2-4 ).Харитаи фарқияти зичии электронии RuDA аз гузариши пасттарин бо назарияи функсионалии зичии аз вақт вобаста (TD-DFT) барои омӯзиши раванди интиқоли заряд ҳисоб карда шуд.Тавре ки дар расми иловагии 5 нишон дода шудааст, зичии электрон пас аз аксбардорӣ асосан аз трифениламин ба воҳиди қабулкунандаи TDP мегузарад, ки онро ба гузариши маъмулии интиқоли зарядҳои дохилимолекулавӣ (КТ) мансуб кардан мумкин аст.
Сохтори химиявии маъдан B Спектрҳои азхудкунии маъдан дар омехтаҳои таносуби гуногуни DMF ва об.C Қиматҳои азхудкунии нормалшудаи RuDA (800 нм) ва ICG (779 нм) нисбат ба вақт дар 0,5 Вт см-2 аз нури лазерии 808 нм.D Фотодеградацияи АБДА бо таъсири РуДА пайдо шудани 1О2 дар омехтахои DMF/H2O дорои таркиби оби гуногун дар зери таъсири шуоъхои лазерии дарозии мавч 808 нм ва кувваи 0,5 Вт/см2 нишон дода мешавад.
Реферат — Спектроскопияи абсорбционии ултрабунафш барои омӯзиши хосиятҳои худмонтажкунии Маъдан дар омехтаҳои DMF ва об дар таносуби гуногун истифода шуд.Чунон ки дар расм нишон дода шудааст.2B, RuDA бандҳои абсорбсиониро аз 600 то 900 нм дар DMF бо банди максималии азхудкунӣ дар 729 нм намоиш медиҳад.Афзоиши миқдори об боиси тадриҷан ба сурхшавии максималии азхудкунии маъдан ба 800 нм гардид, ки ин аз J-агрегатсияи маъдан дар системаи ҷамъшуда шаҳодат медиҳад.Спектрҳои фотолюминесцентии RuDA дар ҳалкунандаҳои гуногун дар расми иловагии 6 нишон дода шудаанд. Ба назар чунин мерасад, ки RuDA люминессенсияи маъмулии NIR-II-ро бо дарозии максималии мавҷи партобҳо нишон медиҳад.1050 нм дар CH2Cl2 ва CH3OH мутаносибан.Гузариши калони Стокс (тақрибан 300 нм)-и РуДА дар бораи тағироти назарраси геометрияи ҳолати ҳаяҷонбахш ва ба вуҷуд омадани ҳолатҳои ҳаяҷонбахши энергияи кам шаҳодат медиҳад.Ҳосилнокии квантии люминессенси маъдан дар CH2Cl2 ва CH3OH мутаносибан 3,3 ва 0,6% муайян карда шуд.Аммо дар омехтаи метанол ва об (5/95, в/в) каме сурхшавии партоб ва камшавии ҳосили квантӣ (0,22%) мушоҳида шудааст, ки шояд аз ҳисоби худмонтажкунии Маъдан бошад. .
Барои визуализатсияи худидоракунии ORE, мо микроскопияи қувваи атомии моеъро (AFM) истифода бурдем, то тағироти морфологии ORE дар маҳлули метанол пас аз илова кардани обро тасаввур кунем.Вақте ки миқдори об аз 80% камтар буд, ҷамъшавии равшан ба мушоҳида нарасид (Расми 7).Аммо дар баробари то 90—95 фоиз зиёд шудани об нано-заррачахои хурд пайдо шуданд, ки ин аз худидоракунии маъдан шаходат медихад Гайр аз ин шуоъкунии лазерй бо дарозии мавчаш 808 нм ба шиддатнокии азхудкунии РуДА дар обй таъсир нарасонд. ҳалли (расми 2C ва расми иловагӣ 8).Баръакси ин, ҷаббиши сабзи индосианин (ICG ҳамчун назорат) дар 779 нм зуд коҳиш ёфт, ки аз устувории аълои RuDA шаҳодат медиҳад.Илова бар ин, устувории RuDA-NPs дар PBS (pH = 5,4, 7,4 ва 9,0), 10% FBS ва DMEM (глюкозаи баланд) тавассути спектроскопияи абсорбсияи ултрабунафш дар вақтҳои гуногун тафтиш карда шуд.Тавре ки дар расми иловагии 9 нишон дода шудааст, тағироти ночиз дар бандҳои азхудкунии RuDA-NP дар PBS дар pH 7.4/9.0, FBS ва DMEM мушоҳида шуд, ки устувории аълои RuDA-NPро нишон медиҳад.Аммо дар мухити турши (рН = 5,4) гидролизи маъдан пайдо шуд.Мо инчунин устувории RuDA ва RuDA-NP-ро бо истифода аз усулҳои баландсифати хроматографияи моеъ (HPLC) арзёбӣ кардем.Тавре ки дар расми иловагии 10 нишон дода шудааст, RuDA дар омехтаи метанол ва об (50/50, v/v) дар як соати аввал устувор буд ва пас аз 4 соат гидролиз мушоҳида шуд.Аммо, барои NP-ҳои RuDA танҳо як қуллаи васеи конкав-конвекс мушоҳида карда шуд.Аз ин рӯ, хроматографияи гузариши gel (GPC) барои арзёбии устувории NPs RuDA дар PBS (pH = 7.4) истифода шуд.Тавре ки дар расми иловагии 11 нишон дода шудааст, пас аз 8 соати инкубатсия дар шароити озмоишшуда, баландии қулла, паҳнои қулла ва майдони қуллаи NP RuDA ба таври назаррас тағир наёфтааст, ки устувории аълои NP RuDAро нишон медиҳад.Илова бар ин, тасвирҳои TEM нишон доданд, ки морфологияи нанозаррачаҳои RuDA-NP пас аз 24 соат дар буфери иловашудаи PBS амалан бетағйир монд (pH = 7.4, Расми 12).
Азбаски худмонтаж метавонад хусусиятҳои гуногуни функсионалӣ ва кимиёвиро дар маъдан таъмин кунад, мо дар омехтаҳои метанол-об ҷудо шудани кислотаи 9,10-антрацендиилбис(метилен)дималони (ABDA, нишондиҳандаи 1O2) мушоҳида кардем.Маъдани дорои обашон гуногун50.Тавре ки дар расми 2D ва расми иловагии 13 нишон дода шудааст, вақте ки миқдори об аз 20% камтар буд, таназзули ABDA мушоҳида нашудааст.Бо афзоиши намӣ то 40%, таназзули ABDA ба амал омад, ки ин аз коҳиши шиддати флуорессенсияи ABDA шаҳодат медиҳад.Инчунин мушоҳида шудааст, ки миқдори зиёди об боиси таназзули тезтар мегардад ва аз он шаҳодат медиҳад, ки худмонтажкунии RuDA барои таназзули ABDA зарур ва муфид аст.Ин падида аз хромофорҳои муосири ACQ (агрегатсияи хомӯшкунӣ) хеле фарқ мекунад.Ҳангоми шуоъ кардан бо лазери дарозии мавҷаш 808 нм ҳосили квантии 1O2 RuDA дар омехтаи 98% H2O/2% DMF 16,4% аст, ки нисбат ба ICG (ΦΔ = 0,2%)51, 82 маротиба зиёд аст, нишон додани самараи намоёни насл 1O2 РуДА дар холати агрегат.
Электрон чарх мезанад, ки бо истифода аз 2,2,6,6-тетраметил-4-пиперидинон (TEMP) ва 5,5-диметил-1-пирролин N-оксиди (DMPO) ҳамчун домҳои чархзанӣ истифода мешавад. АФК.аз ҷониби RuDA.Тавре ки дар расми иловагии 14 нишон дода шудааст, тасдиқ шудааст, ки 1O2 дар вақти шуоъкунӣ аз 0 то 4 дақиқа тавлид мешавад.Илова бар ин, вақте ки RuDA бо DMPO дар зери шуоъ инкубатсия карда шуд, сигнали маъмулии чаҳор хати EPR бо изофаи 1:2:2:1 DMPO-OH· ошкор карда шуд, ки аз ташаккули радикалҳои гидроксилӣ (OH·) шаҳодат медиҳад.Умуман, натиҷаҳои дар боло овардашуда қобилияти RuDA-ро барои ҳавасманд кардани истеҳсоли ROS тавассути раванди фотосенсибилизатсияи навъи I/II нишон медиҳанд.
Барои беҳтар фаҳмидани хосиятҳои электронии RuDA дар шаклҳои мономерӣ ва агрегатӣ, бо усули DFT орбиталҳои сарҳадии молекулавии РуДА дар шаклҳои мономерӣ ва димерӣ ҳисоб карда шуданд.Чунон ки дар расм нишон дода шудааст.3A, баландтарин орбитали молекулавии ишғолшуда (HOMO) аз RuDA мономерӣ дар қад-қади сутуни лиганд делокализатсия карда мешавад ва пасттарин орбитали молекулавии ишғолнашуда (LUMO) дар воҳиди қабулкунандаи TDP марказонида шудааст.Баръакс, зичии электронҳо дар HOMO-и димерӣ дар лигандҳои як молекулаи RuDA мутамарказ шудааст, дар ҳоле ки зичии электронҳо дар LUMO асосан ба воҳиди аксептории молекулаи дигари RuDA мутамарказ шудааст, ки ин нишон медиҳад, ки RuDA дар димер аст.Хусусиятҳои КТ.
A HOMO ва LUMO-и маъдан дар шаклҳои мономерӣ ва димерӣ ҳисоб карда мешаванд.B Сатҳи энергияи ягона ва сегонаи маъдан дар мономерҳо ва димерҳо.C Сатҳи тахминии RuDA ва каналҳои эҳтимолии ISC ҳамчун мономерӣ C ва димерикӣ D. Тирҳо каналҳои эҳтимолии ISC-ро нишон медиҳанд.
Тақсимоти электронҳо ва сӯрохиҳо дар ҳолатҳои ҳаяҷонбахши синглети камэнергияи RuDA дар шаклҳои мономерӣ ва димерӣ бо истифода аз нармафзори Multiwfn 3.852.53, ки бо усули TD-DFT ҳисоб карда шудаанд, таҳлил карда шуд.Тавре ки дар тамғаи иловагӣ нишон дода шудааст.Тавре ки дар расмҳои 1-2 нишон дода шудааст, сӯрохиҳои мономерии RDA асосан дар қад-қади сутуни лиганд дар ин ҳолатҳои ҳаяҷонбахши синглӣ делокализатсия карда мешаванд, дар ҳоле ки электронҳо асосан дар гурӯҳи TDP ҷойгир шудаанд, ки хусусиятҳои дохилимолекулярии CT-ро нишон медиҳанд.Илова бар ин, барои ин ҳолатҳои ҳаяҷонбахши синглӣ, дар байни сӯрохиҳо ва электронҳо кам ё бештар такрор мешаванд ва аз он шаҳодат медиҳанд, ки ин ҳолатҳои ҳаяҷонбахш аз ҳаяҷони маҳаллӣ (LE) саҳми муайяне доранд.Барои димерҳо, ба ғайр аз хусусиятҳои дохилимолекулярии CT ва LE, як қисми муайяни хусусиятҳои байнимолекулярии КТ дар иёлатҳои мувофиқ мушоҳида карда шуданд, махсусан S3, S4, S7 ва S8, ки дар асоси таҳлили байнимолекулярии КТ, бо гузариши байнимолекулярии CT ҳамчун гузариши асосии CT (Ҷадвали иловагӣ).3).
Барои беҳтар фаҳмидани натиҷаҳои таҷрибавӣ, мо минбаъд хосиятҳои ҳолати ҳаяҷонбахши RuDA-ро таҳқиқ кардем, то фарқияти байни мономерҳо ва димерҳоро омӯзем (Ҷадвалҳои иловагӣ 4-5).Тавре ки дар расми 3В нишон дода шудааст, сатњи энергияи њолатњои ба њаяљоншудаи сингл ва сегонаи димер нисбат ба мономер хеле зичтар аст, ки барои кам кардани фосилаи энергияи байни S1 ва Tn мусоидат мекунад. Гузориш шудааст, ки гузариши ISC метавонад дар фосилаи хурди энергетикӣ (ΔES1-Tn <0,3 eV) байни S1 ва Tn54 амалӣ карда шавад. Гузориш шудааст, ки гузариши ISC метавонад дар як фосилаи хурди энергетикӣ (ΔES1-Tn <0,3 eV) байни S1 ва Tn54 амалӣ карда шавад. Тахмин карда мешавад, ки ISC метавонад дар байни неболшой энергетикӣ (ΔES1-Tn <0,3 эВ) дар байни S1 ва Tn54 амалӣ карда шавад. Гузориш шудааст, ки гузариши ISC метавонад дар як фосилаи хурди энергетикӣ (ΔES1-Tn <0,3 eV) байни S1 ва Tn54 амалӣ карда шавад.据报道，ISC 跃迁可以在S1 和Tn54 之间的小能隙（ΔES1-Tn < 0,3 eV）内实现。据报道，ISC 跃迁可以在S1 和Tn54 之间的小能隙（ΔES1-Tn < 0,3 eV）内实现。 Тавассути он, ки ISC пеш аз ҳама, дар пешгӯии неболшой энергетикӣ (ΔES1-Tn < 0,3 эВ) дар байни S1 ва Tn54 амалӣ карда мешавад. Гузориш шудааст, ки гузариши ISC метавонад дар як фосилаи хурди энергетикӣ (ΔES1-Tn <0,3 eV) байни S1 ва Tn54 амалӣ карда шавад.Илова бар ин, танҳо як орбитал, ки ишғол ё ишғол накардааст, бояд дар ҳолати пайвастшудаи сингл ва сегона фарқ кунад, то интеграли ғайрисифри SOC таъмин карда шавад.Ҳамин тариқ, дар асоси таҳлили энергияи ҳаяҷон ва гузариши мадор, ҳама каналҳои имконпазири гузариши ISC дар расм нишон дода шудаанд.3С,Д.Қобили зикр аст, ки дар мономер танҳо як канали ISC мавҷуд аст, дар ҳоле ки шакли димерӣ дорои чаҳор канали ISC мебошад, ки гузариши ISC-ро тақвият дода метавонанд.Аз ин рӯ, оқилона аст, ки тахмин кунем, ки молекулаҳои RuDA ҳар қадар бештар ҷамъ карда шаванд, каналҳои ISC ҳамон қадар дастрастар мешаванд.Аз ин рӯ, агрегатҳои RuDA метавонанд сохторҳои электронии ду-бандро дар ҳолатҳои сингл ва сегона ташкил намуда, фосилаи энергетикиро байни S1 ва Tn дастрас кам кунанд ва ба ин васила самаранокии ISC-ро барои осон кардани тавлиди 1O2 зиёд кунанд.
Барои боз ҳам равшан кардани механизми аслӣ, мо пайвастагии истинод ба комплекси arene-Ru (II) (RuET) -ро бо иваз кардани ду гурӯҳи этилӣ бо ду гурӯҳи фениламини трифениламин дар RuDA синтез кардем (расми 4А, барои тавсифи пурра, нигаред ба ESI, Иловаи 15). -21 ) Аз донор (диэтиламин) то акцептор (TDF), RuET дорои ҳамон хусусиятҳои КТ-и дохилимолекулярӣ бо RuDA мебошад.Тавре ки интизор мерафт, спектри азхудкунии RuET дар DMF як банди интиқоли заряди ками энергияро бо азхудкунии қавӣ дар минтақаи наздики инфрасурх дар минтақаи 600-1100 нм нишон дод (расми 4В).Илова бар ин, ҷамъшавии RuET инчунин бо афзоиши миқдори об мушоҳида карда шуд, ки он дар тағирёбии максималии ҷаббида инъикос ёфт, ки минбаъд бо тасвири моеъи AFM тасдиқ карда шуд (расми 22).Натиҷаҳо нишон медиҳанд, ки RuET, ба монанди RuDA, метавонад ҳолати дохилимолекулярӣ ташкил кунад ва худ ба сохторҳои ҷамъшуда ҷамъ шавад.
Сохтори химиявии RuET.B Спектрҳои азхудкунии RuET дар омехтаҳои таносуби гуногуни DMF ва об.Қитъаҳои C EIS Nyquist барои RuDA ва RuET.Ҷавобҳои фотоҷараёни D-и RuDA ва RuET дар зери таъсири радиатсияи лазерӣ бо дарозии мавҷҳои 808 нм.
Фотодеградатсияи АБДА дар ҳузури RuET бо роҳи шуоъдиҳӣ бо лазер бо дарозии мавҷи 808 нм баҳо дода шуд.Тааҷҷубовар аст, ки дар фраксияҳои гуногуни об таназзули ADA мушоҳида нашудааст (Расми иловагӣ 23).Сабаби эҳтимолӣ дар он аст, ки RuET наметавонад сохтори электронии бандро ба таври муассир ташкил кунад, зеро занҷири этилӣ интиқоли пурсамари зарядҳои байнимолекуляриро мусоидат намекунад.Бинобар ин, спектроскопияи электрохимиявии импеданс (EIS) ва ченкунии фотоҷараёни муваққатӣ барои муқоисаи хосиятҳои фотоэлектрохимикии RuDA ва RuET гузаронида шуд.Мувофиқи нақшаи Nyquist (Расми 4C), RuDA радиуси хеле хурдтарро аз RuET нишон медиҳад, ки ин маънои онро дорад, ки RuDA56 интиқоли электронҳои байнимолекулавӣ ва гузарониши беҳтар дорад.Илова бар ин, зичии фотоҷараёни RuDA нисбат ба RuET (расми 4D) хеле баландтар буда, самаранокии беҳтари интиқоли заряди RuDA57-ро тасдиқ мекунад.Ҳамин тариқ, гурӯҳи фенилҳои трифениламин дар маъдан дар таъмини интиқоли зарядҳои байнимолекулавӣ ва ташаккули сохтори электронии банд нақши муҳим мебозад.
Барои зиёд кардани ҷамъшавии варамҳо ва мутобиқати биологӣ дар vivo, мо минбаъд RuDA-ро бо F127 капсул кардем.Диаметри миёнаи гидродинамикии RuDA-NPs 123,1 нм бо тақсимоти танг (PDI = 0,089) бо истифода аз усули пароканда кардани нури динамикӣ (DLS) муайян карда шуд (Расми 5А), ки ба ҷамъшавии варамҳо тавассути афзоиши гузаранда ва нигоҳдорӣ мусоидат мекунад.EPR) таъсир мерасонад.Тасвирҳои TEM нишон доданд, ки NPs Ore шакли якхелаи сферикӣ доранд, ки диаметри миёна 86 нм мебошад.Қобили зикр аст, ки ҳадди азхудкунии RuDA-NPs дар 800 нм пайдо шуд (Расми иловагӣ 24), ки аз он шаҳодат медиҳад, ки RuDA-NPҳо метавонанд функсияҳо ва хосиятҳои RuDA-ҳои худмонтажкунандаро нигоҳ доранд.Хосилнокии квантии РОС барои NP Ore 15,9 фоизро ташкил медихад, ки ин бо маъдан му-коиса кардан мумкин аст.. Хусусиятхои фототермикии НП-и РуДА дар зери таъсири шуоъхои лазерии дарозии мавчашон 808 нм бо ёрии камераи инфрасурх омухта шуданд.Чунон ки дар расм нишон дода шудааст.5B,C, гурӯҳи назоратӣ (танҳо PBS) каме баланд шудани ҳароратро аз сар гузаронидааст, дар ҳоле ки ҳарорати маҳлули RuDA-NPs бо афзоиши ҳарорат (ΔT) ба 15,5, 26,1 ва 43,0 ° C зуд баланд шуд.Консентратсияи баланд мутаносибан 25, 50 ва 100 мкМ буд, ки ин аз таъсири пурқуввати фототермалии RuDA NPҳо шаҳодат медиҳад.Илова бар ин, барои арзёбии устувории фототермалии RuDA-NP ва муқоиса бо ICG ченакҳои давраи гармидиҳӣ/сардкунӣ гирифта шуданд.Ҳарорати АЭС-ҳои маъдан пас аз панҷ давраи гармкунӣ/хунуккунӣ паст нашуд (расми 5D), ки аз устувории аълои фототермалии НПҳои маъдан шаҳодат медиҳад.Баръакси ин, ICG устувории пасттари фототермалиро нишон медиҳад, ки аз нопадид шудани платои ҳарорати фототермалӣ дар ҳамон шароит дида мешавад.Мувофиқи усули қаблӣ58, самаранокии табдилдиҳии фототермалии RuDA-NP 24,2% ҳисоб карда шуд, ки ин аз маводи фототермалии мавҷуда ба монанди нанобарги тилло (21,0%) ва нанопулакҳои тиллоӣ (13,0%)59 зиёдтар аст.Ҳамин тариқ, NP Ore хосиятҳои аълои фототермалиро нишон медиҳад, ки онҳоро агентҳои умедбахши PTT месозад.
Таҳлили тасвирҳои DLS ва TEM аз NPs RuDA (дохилшуда).В Тасвири гармии консентратсияи гуногуни NP-ҳои RuDA, ки ба радиатсияи лазерӣ дар дарозии мавҷҳои 808 нм (0,5 Вт см-2) дучор шудаанд.C Каҷи табдили фототермалии консентратсияи гуногуни НП-ҳои маъдан, ки маълумоти миқдорӣ мебошанд.B. D Баландшавии ҳарорати ORE NP ва ICG дар тӯли 5 давраи гармкунӣ-сардкунӣ.
Фотоцитотоксикии NPs RuDA бар зидди ҳуҷайраҳои саратони синаи одам MDA-MB-231 дар vitro арзёбӣ шуд.Чунон ки дар расм нишон дода шудааст.6A, B, RuDA-NPs ва RuDA дар сурати мавҷуд набудани шуоъ, ситотоксикии ночизро нишон доданд, ки заҳролудшавии камтари торикии RuDA-NPs ва RuDA-ро дар назар дорад.Аммо, пас аз дучор шудан ба радиатсияи лазерӣ дар дарозии мавҷи 808 нм, RuDA ва RuDA NPs бар зидди ҳуҷайраҳои саратони MDA-MB-231 бо арзишҳои IC50 (консентратсияи ниҳоии ингибиторӣ) мутаносибан 5,4 ва 9,4 мкМ фотоцитотоксикияти қавӣ нишон доданд. ки руДА-НП ва РУДА потенсиали фототерапияи саратон доранд.Илова бар ин, фотоцитотоксикии RuDA-NP ва RuDA минбаъд дар ҳузури витамини C (Vc), як партовгари ROS, барои равшан кардани нақши ROS дар ситотоксикии рӯшноӣ таҳқиқ карда шуд.Аён аст, ки пас аз илова кардани Vc қобилияти қобилияти ҳуҷайраҳо афзоиш ёфт ва арзишҳои IC50-и RuDA ва RuDA NPs мутаносибан 25,7 ва 40,0 μM буданд, ки нақши муҳими ROS-ро дар фотоцитотоксикагии RuDA ва RuDA NPs исбот мекунад.Цитотоксикии рӯшноии RuDA-NPs ва RuDA дар ҳуҷайраҳои саратони MDA-MB-231 тавассути ранг кардани ҳуҷайраҳои зинда/мурда бо истифода аз калсеин AM (флуорессенсияи сабз барои ҳуҷайраҳои зинда) ва йодиди пропидиум (PI, флуорессенсияи сурх барои ҳуҷайраҳои мурда).бо ҳуҷайраҳо тасдиқ карда шудааст) ҳамчун зондҳои флуоресцентӣ.Тавре ки дар расми 6С нишон дода шудааст, ҳуҷайраҳое, ки бо RuDA-NP ё RuDA коркард шудаанд, бидуни нурдиҳӣ қобили ҳаёт боқӣ мемонданд, ки ин аз флуорессенсияи шадиди сабз шаҳодат медиҳад.Баръакс, дар зери шуоъхои лазерй танхо флуоресценти сурх мушохида карда шуд, ки ин фотоцитотоксикии самарабахши РуДА ё РуДА НП-ро тасдик мекунад.Ќобили ќайд аст, ки флуорессенсияи сабз њангоми илова кардани Vc пайдо шуд, ки ин аз вайрон шудани фотоситотоксикии РуДА ва РуДА НП шањодат медињад.Ин натиҷаҳо бо таҳлилҳои фотоцитотоксикӣ дар in vitro мувофиқанд.
Қобилияти аз вояи вобастагии ҳуҷайраҳои A RuDA- ва B RuDA-NP дар ҳуҷайраҳои MDA-MB-231 дар ҳузур ё набудани Vc (0,5 мм), мутаносибан.Барҳои хатогӣ, миёна ± инҳирофи стандартӣ (n = 3). Санҷишҳои ҷуфтнашуда, дуҷонибаи t *p <0,05, **p <0,01 ва ***p <0,001. Санҷишҳои ҷуфтнашуда, дуҷонибаи t *p <0,05, **p <0,01 ва ***p <0,001. Непарные двусторонние т-критерии *p <0,05, **p <0,01 ва ***p <0,001. Санҷишҳои дуҷонибаи t-санҷишҳо *p<0,05, **p<0,01 ва ***p<0,001.未配对的双边t 检验*p < 0,05、**p <0,01 和***p < 0,001。未配对的双边t 检验*p < 0,05、**p <0,01 和***p < 0,001。 Непарные двусторонние t-тесты *p <0,05, **p <0,01 ва ***p <0,001. Санҷишҳои дуҷонибаи t-санҷишҳо *p<0,05, **p<0,01 ва ***p<0,001.C Таҳлили ранг кардани ҳуҷайраҳои зинда/мурда бо истифода аз calcein AM ва propidium йодид ҳамчун зондҳои флуоресцентӣ.Сатри миқёс: 30 мкм.Тасвирҳои намояндагии се такрори биологӣ аз ҳар як гурӯҳ нишон дода шудаанд.D Тасвирҳои флуорессенси конфокалии истеҳсоли ROS дар ҳуҷайраҳои MDA-MB-231 дар шароити гуногуни табобат.Флуорессенсияи сабзи DCF мавҷудияти ROS-ро нишон медиҳад.Бо лазери дарозии мавҷаш 808 нм бо иқтидори 0,5 Вт/см2 дар давоми 10 дақиқа (300 Ҷ/см2) шуоъ кунед.Сатри миқёс: 30 мкм.Тасвирҳои намояндагии се такрори биологӣ аз ҳар як гурӯҳ нишон дода шудаанд.E Cytometry Flow RuDA-NPs (50 μM) ё RuDA (50 μM) таҳлили табобат бо лазери 808 нм (0,5 Вт см-2) дар ҳузур ва набудани Vc (0,5 mM) барои 10 дақиқа.Тасвирҳои намояндагии се такрори биологӣ аз ҳар як гурӯҳ нишон дода шудаанд.F Nrf-2, HSP70 ва HO-1 аз ҳуҷайраҳои MDA-MB-231, ки бо RuDA-NPs (50 μM) бо шуоъдиҳии лазерии 808 нм ё бидуни нури лазерӣ (0,5 Вт см-2, 10 дақ, 300 Ҷ см-2) коркард шудаанд, ҳуҷайраҳо ифода мекунанд 2).Тасвирҳои намояндагии ду такрори биологӣ аз ҳар як гурӯҳ нишон дода шудаанд.
Истеҳсоли ROS дохили ҳуҷайра дар ҳуҷайраҳои MDA-MB-231 бо истифода аз усули рангкунии 2,7-дихлородихидрофлуоресцеин диацетат (DCFH-DA) тафтиш карда шуд.Чунон ки дар расм нишон дода шудааст.6D, ҳуҷайраҳои бо RuDA-NPs ё RuDA коркардшуда ҳангоми радиатсия бо лазери 808 нм флуорессенсияи равшани сабз нишон доданд, ки ин нишон медиҳад, ки RuDA-NPs ва RuDA қобилияти самараноки тавлиди ROS доранд.Баръакс, дар сурати набудани рушнои ва ё Vc танхо сигнали сусти флуоресцентии хучайрахо мушохида карда шуд, ки ин каме пайдо шудани РОС-ро нишон медод.Сатҳи ROS дохили ҳуҷайра дар ҳуҷайраҳои RuDA-NP ва ҳуҷайраҳои бо RuDA коркардшудаи MDA-MB-231 минбаъд тавассути цитометрияи ҷараён муайян карда шуданд.Тавре ки дар расми иловагии 25 нишон дода шудааст, шиддатнокии миёнаи флуоресцентсия (MFI), ки аз ҷониби RuDA-NPs ва RuDA зери шуоъдиҳии лазерии 808 нм тавлид шудаанд, дар муқоиса бо гурӯҳи назоратӣ мутаносибан тақрибан 5,1 ва 4,8 маротиба зиёд шудааст, ки ташаккули аълои AFK-и онҳоро тасдиқ мекунад.иктидор.Аммо, сатҳҳои ROS дохили ҳуҷайра дар ҳуҷайраҳои RuDA-NP ё MDA-MB-231, ки бо RuDA коркард шудаанд, танҳо бо назорат бидуни шуоъҳои лазерӣ ё дар ҳузури Vc, ки ба натиҷаҳои таҳлили флуорессенси конфокалӣ монанд буданд, муқоиса карда мешаванд.
Нишон дода шудааст, ки митохондрия ҳадафи асосии комплексҳои Ru(II)-арен мебошад60.Аз ин рӯ, локализатсияи зерҳуҷайраҳои RuDA ва RuDA-NPs тафтиш карда шуд.Тавре ки дар расми иловагии 26 нишон дода шудааст, RuDA ва RuDA-NP профилҳои тақсимоти ҳуҷайраҳои шабеҳро бо ҷамъшавии баландтарин дар митохондрия нишон медиҳанд (мутаносибан 62,5 ± 4,3 ва 60,4 ± 3,6 нг/мг протеин).Аммо дар фракцияхои ядроии Ore ва NP Ore (мутаносибан 3,5 ва 2,1%) микдори ками Ру ёфт шуд.Фраксияи боқимондаи ҳуҷайра дорои рутений боқимонда буд: 31,7% (30,6 ± 3,4 нг/мг протеин) барои RuDA ва 42,9% (47,2 ± 4,5 нг/мг протеин) барои RuDA-NPs.Умуман, Ore ва NP Ore асосан дар митохондрияҳо ҷамъ мешаванд.Барои арзёбии дисфунксияи митохондриалӣ, мо рангкунии JC-1 ва MitoSOX Redро барои арзёбии потенсиали мембранаи митохондрия ва қобилияти истеҳсоли супероксид истифода кардем.Тавре ки дар расми иловагӣ нишон дода шудааст. 27, флуорессенсияи шадиди сабз (JC-1) ва сурх (MitoSOX Red) дар ҳуҷайраҳои ҳам бо RuDA ва ҳам RuDA-NP дар зери радиатсияи лазерии 808 нм коркардшуда мушоҳида карда шуд, ки ин нишон медиҳад, ки ҳам RuDA ва ҳам RuDA-NP хеле флуоресцентӣ доранд. Он метавонад ба таври муассир деполяризатсияи мембранаи митохондрия ва истеҳсоли супероксидҳоро ба вуҷуд орад.Илова бар ин, механизми марги ҳуҷайраҳо бо истифода аз таҳлили цитометрияи ҷараёнии анексин V-FITC / йодиди пропидиум (PI) муайян карда шуд.Тавре ки дар расми 6E нишон дода шудааст, вақте ки бо лазери 808 нм шуоъ карда мешавад, RuDA ва RuDA-NP дар муқоиса бо PBS ё PBS плюс лазер суръати апоптозии барвақтро (квадранти рости поён) дар ҳуҷайраҳои MDA-MB-231 ба таври назаррас афзоиш доданд.ҳуҷайраҳои коркардшуда.Аммо, вақте ки Vc илова карда шуд, сатҳи апоптозии RuDA ва RuDA-NP хеле аз 50,9% ва 52,0% то 15,8% ва 17,8% коҳиш ёфт, ки ин нақши муҳими РОС-ро дар фотоцитотоксикии RuDA ва RuDA-NP тасдиқ мекунад..Илова бар ин, ҳуҷайраҳои ночизи некротикӣ дар ҳама гурӯҳҳои озмоишшуда мушоҳида карда шуданд (квадранти чапи болои), ки апоптоз метавонад шакли бартаридоштаи марги ҳуҷайраҳо бошад, ки аз ҷониби RuDA ва RuDA-NPs ба вуҷуд омадааст.
Азбаски зарари стресси оксидитивӣ як муайянкунандаи асосии апоптоз аст, омили ядроии марбут ба эритроид 2, омили 2 (Nrf2) 62, танзимгари асосии системаи антиоксидант дар RuDA-NPs MDA-MB-231 таҳқиқ карда шуд.Механизми амали NP-ҳои RuDA, ки дар натиҷаи шуоъкунӣ ба вуҷуд омадаанд.Дар айни замон, ифодаи сафедаи поёноби оксигеназа геме 1 (HO-1) низ муайян карда шуд.Тавре ки дар расми 6F ва расми иловагии 29 нишон дода шудааст, фототерапия бо миёнаравии RuDA-NP сатҳҳои ифодаи Nrf2 ва HO-1-ро дар муқоиса бо гурӯҳи PBS зиёд кардааст, ки нишон медиҳад, ки RuDA-NPҳо метавонанд роҳҳои сигнализатсияи стресси оксидшавиро ҳавасманд кунанд.Илова бар ин, барои омӯзиши эффекти фототермалии RuDA-NPs63, ифодаи сафедаи зарбаи гармии Hsp70 низ арзёбӣ карда шуд.Маълум аст, ки ҳуҷайраҳое, ки бо шуоъдиҳии лазерии RuDA-NPs + 808 нм коркард шудаанд, дар муқоиса бо ду гурӯҳи дигар, ифодаи афзоиши Hsp70-ро нишон доданд, ки аксуламали ҳуҷайра ба гипертермияро инъикос мекунанд.
Натиҷаҳои аҷиб дар vitro моро водор карданд, ки иҷрои in vivo-и RuDA-NP-ро дар мушҳои бараҳна бо варамҳои MDA-MB-231 тафтиш кунем.Тақсимоти бофтаи NP-ҳои RuDA бо роҳи муайян кардани миқдори рутений дар ҷигар, дил, испурч, гурдаҳо, шушҳо ва варамҳо омӯхта шуд.Чунон ки дар расм нишон дода шудааст.7А, миқдори максималии NPs Ore дар узвҳои муқаррарӣ дар вақти мушоҳидаи аввал (4 соат) пайдо шуд, дар ҳоле ки миқдори максималӣ дар бофтаҳои варамҳо 8 соати пас аз сӯзандору, эҳтимолан аз ҳисоби NPs Ore муайян карда шудааст.Таъсири EPR аз LF.Мувофиқи натиҷаҳои тақсимот, давомнокии оптималии коркард бо маъдани NP пас аз ворид шудан 8 соат гирифта шудааст.Барои нишон додани раванди ҷамъшавии RuDA-NPs дар ҷойҳои варамҳо, хусусиятҳои фотоакустикии RuDA-NPs тавассути сабти сигналҳои PA-и RuDA-NPs дар вақтҳои гуногун пас аз тазриқ назорат карда шуданд.Аввалан, сигнали PA-и RuDA-NP in vivo тавассути сабти тасвирҳои PA-и макони варам пас аз тазриқи intratumoral RuDA-NP арзёбӣ карда шуд.Тавре ки дар расми иловагии 30 нишон дода шудааст, RuDA-NPҳо сигнали қавии PA нишон доданд ва байни консентратсияи RuDA-NP ва шиддатнокии сигнали PA таносуби мусбӣ вуҷуд дошт (Расми иловагӣ 30A).Сипас, дар in vivo PA тасвирҳои маконҳои варам пас аз сӯзандоруи РуДА ва RuDA-NP дар нуқтаҳои гуногуни вақт пас аз сӯзандору сабт карда шуданд.Тавре ки дар расми 7B нишон дода шудааст, сигнали PA-и RuDA-NPs аз макони варам тадриҷан афзоиш ёфт ва дар 8 соати пас аз тазриқ ба плато расид, ки бо натиҷаҳои тақсимоти бофтаи бо таҳлили ICP-MS муайяншуда мувофиқат мекунад.Нисбат ба RuDA (Расми иловагӣ 30В), шиддатнокии максималии сигнали PA пас аз 4 соат пас аз тазриқ пайдо шуд, ки суръати тези воридшавии RuDA ба варамро нишон медиҳад.Илова бар ин, рафтори ихроҷи RuDA ва RuDA-NPs тавассути муайян кардани миқдори рутений дар пешоб ва наҷосат тавассути ICP-MS тафтиш карда шуд.Роҳи асосии бартарафсозии RuDA (расми 31) ва RuDA-NPs (расми 7С) тавассути наҷосат аст ва тозакунии самараноки RuDA ва RuDA-NP дар давоми 8 рӯзи омӯзиш мушоҳида шудааст, ки ин маънои онро дорад, ки РДА ва RuDA-NPs метавонанд аз бадан бе заҳролудшавии дарозмуддат самаранок хориҷ карда шаванд.
A. Ex vivo тақсимоти RuDA-NP дар бофтаҳои муш аз рӯи мундариҷаи Ru (фоизи вояи Ru (ID) барои як грамм бофта) дар вақтҳои гуногун пас аз тазриқ муайян карда шуд.Маълумот миёна ± инҳирофи стандартӣ мебошанд (n = 3). Санҷишҳои ҷуфтнашуда, дуҷонибаи t *p <0,05, **p <0,01 ва ***p <0,001. Санҷишҳои ҷуфтнашуда, дуҷонибаи t *p <0,05, **p <0,01 ва ***p <0,001. Непарные двусторонние т-критерии *p <0,05, **p <0,01 ва ***p <0,001. Санҷишҳои дуҷонибаи t-санҷишҳо *p<0,05, **p<0,01 ва ***p<0,001.未配对的双边t 检验*p < 0,05、**p <0,01 和***p < 0,001。未配对的双边t 检验*p < 0,05、**p <0,01 和***p < 0,001。 Непарные двусторонние t-тесты *p <0,05, **p <0,01 ва ***p <0,001. Санҷишҳои дуҷонибаи t-санҷишҳо *p<0,05, **p<0,01 ва ***p<0,001.B PA тасвирҳои маконҳои варамҳои in vivo дар ҳаяҷони 808 нм пас аз воридкунии дохиливаридии RuDA-NPs (10 мкмоль кг-1) дар нуқтаҳои гуногуни вақт.Пас аз воридкунии дохиливаридии RuDA NPs (10 мкмоль кг-1), C Ru аз мушҳо бо пешоб ва наҷосат дар фосилаҳои гуногун хориҷ карда шуд.Маълумот миёна ± инҳирофи стандартӣ мебошанд (n = 3).
Қобилияти гармидиҳии RuDA-NP in vivo дар мушҳои бараҳна бо варамҳои MDA-MB-231 ва RuDA барои муқоиса омӯхта шуд.Чунон ки дар расм нишон дода шудааст.8A ва расми иловагии 32, гурӯҳи назоратӣ (намак) пас аз 10 дақиқаи таъсири доимӣ тағироти камтари ҳароратро (ΔT ≈ 3 °C) нишон дод.Бо вуҷуди ин, ҳарорати RuDA-NPs ва RuDA бо ҳарорати максималии мутаносибан 55,2 ва 49,9 °C зуд баланд шуда, гипертермияи кофӣ барои табобати саратон дар vivo таъмин карда мешавад.Баландшавии ҳарорати баланд барои NPs RuDA (ΔT ≈ 24°C) дар муқоиса бо RuDA (ΔT ≈ 19°C) метавонад аз сабаби гузариши беҳтар ва ҷамъшавии он дар бофтаҳои варамҳо аз ҳисоби таъсири EPR бошад.
Тасвирҳои гармидиҳии инфрасурх аз мушҳо бо варамҳои MDA-MB-231, ки бо лазери 808 нм дар вақтҳои гуногун 8 соат пас аз тазриқ пошида шудаанд.Тасвирҳои намояндагии чор такрори биологӣ аз ҳар як гурӯҳ нишон дода шудаанд.B Ҳаҷми нисбии варам ва C Миқдори миёнаи варами гурӯҳҳои гуногуни мушҳо ҳангоми табобат.D Каҷҳои вазни бадани гурӯҳҳои гуногуни мушҳо.Бо лазери дарозии мавҷаш 808 нм бо иқтидори 0,5 Вт/см2 дар давоми 10 дақиқа (300 Ҷ/см2) шуоъ кунед.Барҳои хатогӣ, миёна ± инҳирофи стандартӣ (n = 3). Санҷишҳои ҷуфтнашуда, дуҷонибаи t *p <0,05, **p <0,01 ва ***p <0,001. Санҷишҳои ҷуфтнашуда, дуҷонибаи t *p <0,05, **p <0,01 ва ***p <0,001. Непарные двусторонние т-критерии *p <0,05, **p <0,01 ва ***p <0,001. Санҷишҳои дуҷонибаи t-санҷишҳо *p<0,05, **p<0,01 ва ***p<0,001.未配对的双边t 检验*p < 0,05、**p <0,01 和***p < 0,001。未配对的双边t 检验*p < 0,05、**p <0,01 和***p < 0,001。 Непарные двусторонние t-тесты *p <0,05, **p <0,01 ва ***p <0,001. Санҷишҳои дуҷонибаи t-санҷишҳо *p<0,05, **p<0,01 ва ***p<0,001. E H&E ранг кардани тасвирҳои узвҳои асосӣ ва варамҳо аз гурӯҳҳои гуногуни табобат, аз ҷумла Saline, Saline + Laser, RuDA, RuDA + Laser, RuDA-NPs ва RuDA-NPs + Гурӯҳҳои лазерӣ. E H&E ранг кардани тасвирҳои узвҳои асосӣ ва варамҳо аз гурӯҳҳои гуногуни табобат, аз ҷумла Saline, Saline + Laser, RuDA, RuDA + Laser, RuDA-NPs ва RuDA-NPs + Гурӯҳҳои лазерӣ. Изображения окрашивания органҳои E H&E асосҳо ва опухолей аз гурӯҳҳои гуногуни лечения, включая группа физиологического раствора, физиологи физиологӣ + лазера, RuDA, RuDA + Laser, RuDA-NPs ва RuDA-NPs + Laser. E H&E ранг кардани тасвирҳои узвҳои асосӣ ва варамҳо аз гурӯҳҳои гуногуни табобат, аз ҷумла шӯр, шӯр + лазер, RuDA, RuDA + лазер, RuDA-NPs ва RuDA-NPs + гурӯҳҳои лазерӣ.来自 不同 治疗 的 器官 和 肿瘤 的 的 肿瘤 的 的 的 的 的 图像 图像 图像 图像 图像 图像, 包括 盐水, 盐 盐水 水, 盐 水 水, 盐 + 激光, Рудза + 激光, Рудаж-NPS 和 ruda-nps 和.来自不同治疗组的主要器官和肿瘤的E H&E Окрашивание E H&E органхои асосй ва опухолей аз гуруххои гуногуни лечения, включая физиологи раствор, физиологи раствор + лазер, RuDA, RuDA + лазер, RuDA-NPs ва RuDA-NPs + лазер. E H&E ранг кардани узвҳо ва варамҳои асосӣ аз гурӯҳҳои гуногуни табобат, аз ҷумла шӯр, намак + лазер, RuDA, RuDA + лазер, RuDA-NPs ва RuDA-NPs + лазер.Сатри миқёс: 60 мкм.
Таъсири фототерапия дар in vivo бо NPs RuDA ва RuDA баҳо дода шуд, ки дар он мушҳои урён бо варамҳои MDA-MB-231 бо як вояи 10,0 мкмоль кг-1 тавассути рагҳои дум ба дохили рагҳои RuDA ё RuDA NP сӯзонида шуданд ва сипас 8 соат пас аз тазриқ.радиатсияи лазерӣ бо дарозии мавҷ 808 нм.Тавре ки дар расми 8B нишон дода шудааст, ҳаҷми варамҳо дар гурӯҳҳои шӯр ва лазерӣ ба таври назаррас афзоиш ёфтанд, ки ин нишон медиҳад, ки шуоъҳои шӯр ё лазерии 808 ба афзоиши варамҳо таъсири кам доштанд.Тавре ки дар гурӯҳи шӯр, афзоиши босуръати варамҳо дар мушҳо, ки бо RuDA-NPs ё RuDA табобат карда шудаанд, дар сурати набудани нури лазерӣ мушоҳида карда шуд, ки заҳролудшавии пасти торикии онҳоро нишон дод.Баръакси ин, пас аз шуоъдиҳии лазерӣ, ҳам RuDA-NP ва ҳам табобати RuDA регрессияи назарраси варамро бо коҳиши ҳаҷми варамҳо мутаносибан 95,2% ва 84,3%, дар муқоиса бо гурӯҳи намакзадашуда, нишон медиҳанд, ки PDT-и аълои синергетикӣ., миёнаравӣ бо таъсири RuDA/CHTV.– NP ё Ore.Дар муқоиса бо RuDA, NPs RuDA таъсири беҳтари фототерапевтӣ нишон доданд, ки асосан аз таъсири EPR-и NPs RuDA буд.Натиҷаҳои монеъшавии афзоиши варамҳо минбаъд аз рӯи вазни варами дар рӯзи 15-уми табобат ҷудошуда арзёбӣ карда шуданд (расми 8C ва расми иловагӣ 33).Миқдори миёнаи варамҳо дар мушҳои муолиҷаи RuDA-NP ва мушҳои бо RuDA табобатшуда мутаносибан 0,08 ва 0,27 г буд, ки нисбат ба гурӯҳи назоратӣ (1,43 г) хеле сабуктар буд.
Илова бар ин, вазни бадани мушҳо ҳар се рӯз барои омӯзиши заҳролудшавии торикии RuDA-NPs ё RuDA in vivo сабт карда шуд.Тавре ки дар расми 8D нишон дода шудааст, барои ҳамаи гурӯҳҳои табобат фарқияти назаррас дар вазни бадан мушоҳида нашудааст. Ғайр аз он, ранг кардани гематоксилин ва эозин (H&E) узвҳои асосӣ (дил, ҷигар, испурч, шуш ва гурда) аз гурӯҳҳои гуногуни табобат гузаронида шуд. Ғайр аз он, ранг кардани гематоксилин ва эозин (H&E) узвҳои асосӣ (дил, ҷигар, испурч, шуш ва гурда) аз гурӯҳҳои гуногуни табобат гузаронида шуд. Кроме того, бо проведено окрашивание гематоксилином ва эозином (H&E) органҳои асосии (сердца, печени, селезенки, легких ва почек) аз гурӯҳҳои разных лечения. Илова бар ин, ранг кардани гематоксилин ва эозин (H&E) узвҳои асосӣ (дил, ҷигар, испурч, шуш ва гурдаҳо) аз гурӯҳҳои гуногуни табобат гузаронида шуд.此外，对不同治疗组的主要器官（心脏、肝脏、脾脏、肺和同治疗组的主要器官 (Ҳ&Д) Кроме того, проводили окрашивание гематоксилином и эозином (H&E) органхои асосй (сердца, печени, селезенки, легких ва почек) дар гуруххои гуногуни лечения. Илова бар ин, гематоксилин ва эозин (H&E) ранг кардани узвҳои асосӣ (дил, ҷигар, испурч, шуш ва гурда) дар гурӯҳҳои гуногуни табобат гузаронида шуд.Тавре ки дар расми нишон дода шудааст.8E, тасвирҳои рангкунии H&E панҷ узвҳои асосӣ аз RuDA-NPs ва RuDA ҳеҷ гуна нуқсонҳои возеҳ ё осеби узвҳоро нишон намедиҳанд. 8E, тасвирҳои рангкунии H&E панҷ узвҳои асосӣ аз RuDA-NPs ва RuDA ҳеҷ гуна нуқсонҳои возеҳ ё осеби узвҳоро нишон намедиҳанд.Чунон ки дар расм нишон дода шудааст.8Э, изображенияи окрашивания Х&Е пяти органхои асосй аз гурухи РуДА-НПс ва РуДА органхои ахолии чамъият ё поврежденияро нишон намедиханд. 8E, H&E тасвирҳои рангкунии панҷ узвҳои асосии RuDA-NPs ва RuDA ҳеҷ гуна нуқсон ё осеби узвҳоро нишон намедиҳанд.如图8E 所示，来自RuDA-NPs 和RuDA 组的五个主要器官的H&E 染色图像没有显图像没有显示图像没有显示弁如图8E 所示，来自RuDA-NPs 和RuDA 组的五个主要器官的H&E Как показано на рисунке 8E, изображения окрашивания H&E пяти асосҳои ташкилотҳо аз гурӯҳи RuDA-NPs и RuDA не показали явных аномалий ё повреждения органҳо. Тавре ки дар расми 8E нишон дода шудааст, тасвирҳои рангкунии H&E аз панҷ узвҳои асосӣ аз RuDA-NPs ва RuDA ягон нуқсонҳои возеҳ ё осеби узвро нишон надоданд.Ин натиҷаҳо нишон доданд, ки на RuDA-NP ва на RuDA аломатҳои заҳролудшавӣ дар vivo нишон надодаанд. Гузашта аз ин, H&E рангкунии тасвирҳои омосҳо нишон дод, ки ҳам гурӯҳҳои RuDA + Laser ва RuDA-NPs + Laser метавонанд боиси нобудшавии шадиди ҳуҷайраҳои саратон шаванд ва самаранокии хуби фототерапевтии RuDA ва RuDA-NPs дар vivo нишон медиҳанд. Гузашта аз ин, H&E рангкунии тасвирҳои омосҳо нишон дод, ки ҳам гурӯҳҳои RuDA + Laser ва RuDA-NPs + Laser метавонанд боиси нобудшавии шадиди ҳуҷайраҳои саратон шаванд ва самаранокии хуби фототерапевтии RuDA ва RuDA-NPs дар vivo нишон медиҳанд.Илова бар ин, тасвирҳои варамҳои гематоксилин-эозини олудашуда нишон доданд, ки ҳам гурӯҳҳои RuDA+Laser ва ҳам RuDA-NPs+Laser метавонанд нобудшавии шадиди ҳуҷайраҳои саратонро ба вуҷуд оранд, ки самаранокии баланди фототерапевтии RuDA ва RuDA-NPs дар vivo нишон медиҳанд.此外, 肿瘤 的 h & e 染色 图像 显示, Ruga + Laser 和 Ruda + Ruda-NPS + Лазер + Лаза.此外, 肿瘤 的 & e 染色 显示, Ruda + Laser 和 RUDAN 和 RUDA-NPS + Лазер + Лазер ……Илова бар ин, тасвирҳои варамҳои гематоксилин ва эозини олудашуда нишон доданд, ки ҳам гурӯҳҳои RuDA+Laser ва ҳам RuDA-NPs+Laser боиси нобудшавии шадиди ҳуҷайраҳои саратон гардида, самаранокии баланди фототерапевтии RuDA ва RuDA-NPs дар vivo нишон доданд.
Хулоса, комплекси Ru(II)-arene (RuDA) бо лигандҳои навъи DA барои осон кардани раванди ISC бо истифода аз усули агрегатсия тарҳрезӣ шудааст.RuDA-и синтезшуда метавонад тавассути таъсири мутақобилаи ғайриковалентӣ худ ба худ ҷамъ шавад, то системаҳои супрамолекулии аз RuDA гирифташударо ташкил кунад ва ба ин васила ба ташаккули 1O2 ва табдили муассири фототермалӣ барои табобати саратони рӯшноӣ мусоидат кунад.Чолиби диккат аст, ки РуДА мономерй дар 808 нм нури лазерй 1О2 хосил на-кард, балки дар холати чамъшуда микдори зиёди 1О2-ро ба вучуд оварда, окилона ва самарабахш будани лоихаи моро нишон медихад.Тадқиқотҳои минбаъда нишон доданд, ки маҷмӯаи супрамолекулярӣ ба RuDA дорои хосиятҳои беҳтаршудаи фотофизикӣ ва фотохимиявӣ, аз қабили азхудкунии сурх ва муқовимат ба фотосафедкунӣ мебошад, ки барои коркарди PDT ва PTT хеле матлуб мебошанд.Таҷрибаҳои ҳам in vitro ва ҳам дар in vivo нишон доданд, ки NPs RuDA бо мутобиқати хуби биологӣ ва ҷамъшавии хуб дар варам фаъолияти аълои зидди саратонро ҳангоми нурдиҳии лазерӣ дар дарозии мавҷи 808 нм нишон медиҳанд.Ҳамин тариқ, NPs RuDA ҳамчун реагентҳои самарабахши бимодалии супрамолекулярии PDT/PTW маҷмӯи фотосенсибилизаторҳоро, ки дар дарозии мавҷҳои аз 800 нм фаъол шудаанд, ғанӣ мегардонанд.Тарҳрезии консептуалии системаи супрамолекулярӣ роҳи муассир барои фотосенсибилизаторҳои бо NIR фаъолшуда бо эффектҳои аълои фотосенсибилизаториро таъмин мекунад.
Ҳама маводи кимиёвӣ ва ҳалкунандаҳо аз таъминкунандагони тиҷоратӣ гирифта шуда, бидуни тозакунии минбаъда истифода мешуданд.RuCl3 аз Boren Precious Metals Co., Ltd. (Кунминг, Чин) харида шудааст.[(η6-p-cym)Ru(fendio)Cl]Cl (фендио = 1,10-фенантролин-5,6-дион) ва 4,7-бис[4-(N,N-дифениламино)фенил]-5 ,6-Диамино-2,1,3-бензотиадиазол мувофиқи таҳқиқоти қаблӣ64,65 синтез карда шуд.Спектрҳои NMR дар спектрометри Bruker Avance III-HD 600 MHz дар Маркази санҷиши таҳлилии Донишгоҳи Ҷанубу Шарқӣ бо истифода аз d6-DMSO ё CDCl3 ҳамчун ҳалкунанда сабт карда шуданд.Тағйирёбии химиявӣ δ дар ppm дода шудааст.нисбат ба тетраметилсилан ва константаҳои мутақобилаи J бо қиматҳои мутлақ дар герц дода мешаванд.Масс-спектрометрияи баландсифат (HRMS) дар асбоби Agilent 6224 ESI/TOF MS анҷом дода шуд.Таҳлили элементҳои C, H ва N дар анализатори элементарии Vario MICROCHNOS (Elementar) анҷом дода шуд.Спектрҳои намоёни ултрабунафш дар спектрофотометри Shimadzu UV3600 чен карда шуданд.Спектрҳои флуоресцентӣ дар спектрофлюориметри Shimadzu RF-6000 сабт карда шуданд.Спектрҳои EPR дар асбоби Bruker EMXmicro-6/1 сабт карда шуданд.Морфология ва сохтори намунаҳои омодашуда дар асбобҳои FEI Tecnai G20 (TEM) ва Bruker Icon (AFM), ки бо шиддати 200 кВ кор мекунанд, омӯхта шуданд.Парокандашавии нури динамикӣ (DLS) дар анализатори Nanobrook Omni (Brookhaven) анҷом дода шуд.Хусусиятҳои фотоэлектрохимикӣ дар дастгоҳи электрохимиявӣ (CHI-660, Чин) чен карда шуданд.Тасвирҳои фотоакустикӣ бо истифода аз системаи FUJIFILM VisualSonics Vevo® LAZR гирифта шуданд.Тасвирҳои конфокалӣ бо истифода аз микроскопи конфокалии Olympus FV3000 гирифта шуданд.Таҳлили FACS дар ситометри ҷараёни BD Calibur гузаронида шуд.Таҷрибаҳои хроматографияи моеъи баландсифат (HPLC) дар системаи Waters Alliance e2695 бо истифода аз детектори 2489 UV/Vis анҷом дода шуданд.Санҷишҳои хроматографияи гелӣ (GPC) дар асбоби Thermo ULTIMATE 3000 бо истифода аз детектори шохиси шикастани ERC RefratoMax520 сабт карда шуданд.
[(η6-p-cym)Ru(fendio)Cl]Cl (фендио = 1,10-фенантролин-5,6-дион)64 (481,0 мг, 1,0 ммоль), 4,7-бис[4 -(N, N-diphenilamino)phenyl]-5,6-diamino-2,1,3-benzothiadiazole 65 (652,0 мг, 1,0 ммоль) ва кислотаи сиркои пиряхӣ (30 мл) дар яхдони рефлюкс барои 12 соат омехта карда шуданд.Сипас ҳалкунанда дар вакуум бо истифода аз бухоркунандаи гардишкунанда хориҷ карда шуд.Боқимондаи ҳосилшуда бо хроматографияи флеш-сутун (силикагел, CH2Cl2:MeOH=20:1) тоза карда шуд, то RuDA ҳамчун хокаи сабз (ҳосил: 877,5 мг, 80%) ба даст омад.анус.Ҳисоб карда мешавад барои C64H48Cl2N8RuS: C 67,84, H 4,27, N 9,89.Ёфт: С 67,92, Н 4,26, N 9,82.1H NMR (600 МГц, d6-DMSO) δ 10,04 (с, 2Н), 8,98 (с, 2Н), 8,15 (с, 2Н), 7,79 (с, 4Н), 7,44 (с, 8Н), 7,21 (д, J = 31,2 Гц, 16Н), 6,47 (с, 2Н), 6,24 (с, 2Н), 2,69 (с, 1Н), 2 ,25 (с, 3Н), 0,99 (с, 6Н).138c nmr (150 мгз, D6-DNSSO), №82.81, 149.91, 134.01, 124.01, 124.01, 124.81, 124.41, 104.49, 103.49, 103.49, 103.49, 103.49, 103.49, 103.49 , 103., 86,52, 84,75, 63,29, 30,90, 22,29, 18,83.ESI-MS: м / з [M-Cl]+ = 1097,25.
Синтези 4,7-бис[4-(N,N-диэтиламино)фенил-5,6-диамино-2,1,3-бензотиадиазол (L2): L2 дар ду марҳила синтез карда шуд.Pd(PPh3)4 (46 мг, 0,040 ммоль) ба N,N-диэтил-4-(трибутилстанил)анилин (1,05 г, 2,4 ммоль) ва махлули 4,7-дибромо-5,6-динитро - 2, 1,3-бензотиадиазол (0,38 г, 1,0 ммоль) дар толуол хушк (100 мл).Ин омехта дар 100 ° C барои 24 соат омехта карда шуд.Пас аз хориҷ кардани толуол дар вакуум, моддаи сахти ҳосилшуда бо эфири нафтӣ шуста шуд.Баъд омехтаи ин пайвастагиро (234,0 мг, 0,45 ммоль) ва хокаи оҳан (0,30 г, 5,4 ммоль) дар кислотаи сирко (20 мл) дар 80°С 4 соат омехта карданд.Омехтаи реаксия ба об рехта шуд ва сахти қаҳваранг дар натиҷаи филтратсия ҷамъ карда шуд.Маҳсулот ду маротиба бо сублиматсияи вакуумӣ тоза карда шуд, то як сахти сабз дод (126,2 мг, ҳосили 57%).анус.Ҳисоб карда мешавад барои C26H32N6S: C 67,79, H 7,00, N 18,24.Ёфт: С 67,84, Н 6,95, Н 18,16.1Н ЯМР (600 МГц, CDCl3), δ (ppm) 7.42 (д, 4Н), 6.84 (д, 4Н), 4.09 (с, 4Н), 3.42 (д, 8Н), 1.22 (с, 12Н).13С NMR (150 МГс, CDCl3), δ (ppm) 151,77, 147,39, 138,07, 131,20, 121,09, 113,84, 111,90, 44,34, 12,77.ESI-MS: м / з [М+Н]+ = 461,24.
Пайвастагиҳо бо тартиби шабеҳ ба RuDA омода ва тоза карда шуданд.анус.Ҳисоб карда мешавад барои C48H48Cl2N8RuS: C 61,27, H 5,14, N 11,91.Ёфт: C, 61,32, H, 5,12, N, 11,81,1H NMR (600 MHz, d6-DMSO), δ (ppm) 10,19 (s, 2H), 9,28 (s, 2H), 8.09 (s, 2H), 7,95 (с, 4Ч), 6,93 (с, 4Ч), 6,48 (д, 2Ч), 6,34 (с, 2Ч), 3,54 (т, 8Ч), 2,80 (м, 1Ч), 2,33 (с, 3Ч), 1,31 (t, 12H), 1.07 (с, 6Н).13C NMR (151 MHZ, CDCL3), Δ (PPM3) 158.20, 158.38, 128,39,39,39,49, 118,79,75, 115.74, 115.73, 104.23, 87.23, 87.23, 87.23, 87.23, 87.23., 38.06, 31.22, 29.69, 22.29, 19.19, 14.98, 12.93.ESI-MS: м / з [M-Cl]+ = 905,24.
RuDA дар MeOH/H2O (5/95, v/v) дар консентратсияи 10 μM гудохта шуд.Спектри азхудкунии РуДА дар хар 5 дакика дар спектрофотометри Shimadzu UV-3600 зери шуоъ бо нури лазери дарозии мавчаш 808 нм (0,5 Вт/см2) чен карда шуд.Спектрҳои ICG дар ҳамон шароите, ки стандарт сабт шудааст.
Спектрҳои EPR дар спектрометри Bruker EMXmicro-6/1 бо иқтидори микроволновка 20 мВт, диапазони сканер 100 Г ва модуляцияи майдони 1 Г. 2,2,6,6-тетраметил-4-пиперидон сабт карда шуданд. (TEMP) ва 5,5-диметил-1-пирролин N-оксиди (DMPO) ҳамчун домҳои чархиш истифода шуданд.Спектрҳои резонанси электронии спинӣ барои маҳлулҳои омехтаи RuDA (50 мкМ) ва TEMF (20 мМ) ё DMPO (20 мм) дар зери таъсири радиатсияи лазерӣ бо дарозии мавҷи 808 нм (0,5 Вт/см2) сабт карда шуданд.
Ҳисобҳои DFT ва TD-DFT барои RuDA дар сатҳҳои PBE1PBE/6–31 G*//LanL2DZ дар маҳлули обӣ бо истифода аз барномаи Gaussian 1666,67,68 гузаронида шуданд.Тақсимоти HOMO-LUMO, сӯрохӣ ва электронии ҳолати синглети кам энергияи ҳаяҷонбахши RuDA бо истифода аз барномаи GaussView (версияи 5.0) тарҳрезӣ карда шуд.
Мо аввал кӯшиш кардем, ки самаранокии тавлиди 1O2 RuDA-ро бо истифода аз спектроскопияи маъмулии ултрабунафш бо ICG (ΦΔ = 0.002) ҳамчун стандарт чен кунем, аммо фотодеградатсияи ICG ба натиҷаҳо сахт таъсир кард.Ҳамин тариқ, ҳосили квантии 1О2 RuDA бо роҳи муайян кардани тағирёбии шиддатнокии флуорессенсияи ABDA дар тақрибан 428 нм ҳангоми шуоъ кардани лазер бо дарозии мавҷи 808 нм (0,5 Вт/см2) чен карда шуд.Таҷрибаҳо дар NPs RuDA ва RuDA (20 μM) дар об/DMF (98/2, v/v) дорои ABDA (50 μM) гузаронида шуданд.Ҳосили квантии 1O2 бо формулаи зерин ҳисоб карда шуд: ΦΔ (PS) = ΦΔ (ICG) × (rFS/APS)/(rICG/AICG).rPS ва rICG суръати реаксияи ABDA бо 1O2 мебошанд, ки мутаносибан аз фотосенсибилизатор ва ICG гирифта шудаанд.APS ва AICG мутаносибан азхудкунии фотосенсибилизатор ва ICG дар 808 нм мебошанд.
Андозагирии AFM дар шароити моеъ бо истифода аз реҷаи скан дар системаи Bruker Dimension Icon AFM гузаронида шуд.Бо истифода аз сохтори кушод бо ҳуҷайраҳои моеъ, ҳуҷайраҳо ду маротиба бо этанол шуста ва бо ҷараёни нитроген хушк карда шуданд.Ҳуҷайраҳои хушкшударо ба сари оптикии микроскоп гузоред.Дарҳол як қатраи намунаро ба ҳавзи моеъ ҷойгир кунед ва онро бо истифода аз сӯзандоруи пластикии якдафъаинаи стерилизатсияшуда ва сӯзани стерилизатсияшуда дар болои консол ҷойгир кунед.Қатраи дигар мустақиман ба рӯи намуна гузошта мешавад ва вақте ки сари оптикӣ паст мешавад, ду қатра якҷоя шуда, байни намуна ва обанбори моеъ менискро ташкил медиҳанд.Андозагирии AFM бо истифода аз конти нитриди-шакли SCANASYST-FLUID V (Брукер, сахтии k = 0,7 N m-1, f0 = 120-180 кГц) гузаронида шуд.
Хроматограммаҳои HPLC дар системаи Waters e2695, ки бо сутуни Phoenix C18 муҷаҳҳаз шудаанд (250 × 4,6 мм, 5 микрон) бо истифода аз детектори 2489 UV/Vis.Дарозии мавҷи детектор 650 нм аст.Фазаҳои мобилии А ва В мутаносибан об ва метанол буданд ва суръати ҷараёни фазаҳои мобилӣ 1,0 мл·мин-1 буд.Градиент (ҳалкунандаи B) чунин буд: 100% аз 0 то 4 дақиқа, 100% то 50% аз 5 то 30 дақиқа ва аз 31 то 40 дақиқа ба 100% аз нав барқарор карда шуд.Маъдан дар маҳлули омехтаи метанол ва об (50/50, аз рӯи ҳаҷм) дар консентратсияи 50 мкм гудохта шуд.Ҳаҷми сӯзандору 20 мкл буд.
Санҷишҳои GPC дар асбоби Thermo ULTIMATE 3000 сабт карда шуданд, ки бо ду сутуни PL aquagel-OH MIXED-H муҷаҳҳаз шудаанд (2×300×7,5 мм, 8 мкм) ва детектори шохиси шикастани ERC RefratoMax520.Сутуни GPC бо об бо суръати ҷараёни 1 мл/дақ дар 30°C элюта карда шуд.NPs маъдан дар маҳлули PBS (рН = 7,4, 50 μM) гудохта шуданд, ҳаҷми тазриқ 20 мкл буд.
Фотоҷараёнҳо дар дастгоҳи электрохимиявӣ (CHI-660B, Чин) чен карда шуданд.Ҷавобҳои оптоэлектроникӣ ҳангоми фурӯзон ва хомӯш кардани лазер (808 нм, 0,5 Вт/см2) дар як қуттии сиёҳ мутаносибан дар шиддати 0,5 В чен карда шуданд.Як ҳуҷайраи стандартии се электрод бо электроди карбони шишагини L (GCE) ҳамчун электроди корӣ, электроди стандартии каломелӣ (SCE) ҳамчун электроди истинод ва диски платина ҳамчун электроди муқобил истифода мешуд.Ба сифати электролит маҳлули 0,1 М Na2SO4 истифода шудааст.
Хатти ҳуҷайраҳои саратони синаи инсон MDA-MB-231 аз KeyGEN Biotec Co., LTD (Нанҷинг, Чин, рақами каталог: KG033) харида шудааст.Ҳуҷайраҳо дар як қабати дар Medium Modified Eagle's Dulbecco (DMEM, глюкозаи баланд) парвариш карда шуданд, ки бо маҳлули 10% хунобаи гов (FBS), пенициллин (100 мкг/мл) ва стрептомицин (100 мкг/мл) илова карда шуданд.Ҳама ҳуҷайраҳо дар 37 ° C дар атмосфераи намӣ, ки 5% CO2 доранд, парвариш карда шуданд.
Таҳлили MTT барои муайян кардани ситотоксикгии RuDA ва RuDA-NPs дар ҳузур ва набудани шуоъҳои рӯшноӣ, бо Vc ё бидуни Vc (0,5 мМ) истифода шудааст.Ҳуҷайраҳои саратони MDA-MB-231 дар лавҳаҳои 96-чоҳ дар зичии ҳуҷайра тақрибан 1 x 105 ҳуҷайра/мл/чоҳ парвариш карда шуданд ва барои 12 соат дар 37,0°С дар атмосфераи 5% CO2 ва 95% ҳаво инкубатсия карда шуданд.Ба ҳуҷайраҳо NP-ҳои RuDA ва RuDA, ки дар об ҳал шудаанд, илова карда шуданд.Пас аз 12 соати инкубатсия, ҳуҷайраҳо ба нури лазерии 0,5 Вт см -2 дар дарозии мавҷи 808 нм дар тӯли 10 дақиқа (300 Ҷ см -2) дучор карда шуданд ва сипас дар торикӣ барои 24 соат инкубатсия карда шуданд.Сипас ҳуҷайраҳо бо MTT (5 мг/мл) барои 5 соати дигар инкубатсия карда шуданд.Ниҳоят, миёнаравро ба DMSO (200 мкл) иваз кунед, то кристаллҳои формазани арғувонро ҳал кунед.Қиматҳои OD бо истифода аз хонандаи микроплата бо дарозии мавҷи 570/630 нм чен карда шуданд.Арзиши IC50 барои ҳар як намуна бо истифода аз нармафзори SPSS аз хати каҷҳои вокуниш ба вокуниш, ки аз ҳадди ақал се озмоиши мустақил гирифта шудааст, ҳисоб карда шуд.
Ҳуҷайраҳои MDA-MB-231 бо RuDA ва RuDA-NP дар консентратсияи 50 μM коркард карда шуданд.Пас аз 12 соати инкубатсия, ҳуҷайраҳо бо лазер бо дарозии мавҷи 808 нм ва иқтидори 0,5 Вт/см2 дар тӯли 10 дақиқа (300 Ҷ/см2) шуоъ карда шуданд.Дар гурӯҳи витамини C (Vc), ҳуҷайраҳо пеш аз шуои лазерӣ бо 0,5 mM Vc коркард карда шуданд.Пас аз он ҳуҷайраҳо дар торикӣ барои 24 соати иловагӣ инкубатсия карда шуданд, сипас бо калсеин AM ва йодид пропидиум (20 мкг/мл, 5 мкл) барои 30 дақиқа ранг карда, сипас бо PBS (10 мкл, pH 7,4) шуста шуданд.тасвирҳои ҳуҷайраҳои доғдор.